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重复实验亲历者:对韩春雨新基因编辑技术的几点疑惑
来源: 河南科技报 | 作者:agriculture-100 | 发布时间: 2019-04-18 | 649 次浏览 | 分享到:
近日,蔡宇伽向澎湃新闻分享了他的实验过程,他表示愿意实名聊聊他的困惑。

近日,蔡宇伽向澎湃新闻分享了他的实验过程,他表示愿意实名聊聊他的困惑。9月7日,蔡宇伽把韩春雨课题组论文中关于Figure4(图4)的疑惑,邮件给《自然-生物技术》的编辑,等待回应。

  蔡宇伽是来自中国的丹麦奥胡斯大学博士后,他先后师从Jacob Mikkelsen 和Soren Paludan教授,研究方向是开发基因治疗相关技术,包括病毒载体、基因编辑工具以及利用基因编辑工具研究免疫学问题,曾以第一作者身份在《eLIFE》期刊发表两篇论文。

       NgAgo技术是一门崭新的基因编辑技术,由河北科技大学副教授韩春雨课题组5月2日在《自然-生物技术》上发表。NgAgo是“Natronobacterium gregoryi Argonaute”的简称,也就是来自格氏嗜盐碱杆菌的核酸内切酶。它不同于Argonaute(Ago)家族诸多需要高温的酶,能在37摄氏度常温下进行操作。这使得它能够和当今最为时兴的“基因魔剪”CRISPR-CAS9一起,共同效力于“编辑”目标基因,实现对特定DNA片段的敲除、加入等。论文发表4个多月后,因多个实验室表示无法重复实验,NgAgo技术受到质疑。

  两次尝试重复实验失败,蔡宇伽说,“这是我个人的例子,但是不能证明这个不能重复,还需要更多的人做实验,公开数据。”他还提到:“科学家是有义务去公开数据,让别人去重复。我个人认为,科学是站在别人的肩膀上,同时你也要愿意成为别人肩膀,这样科学才能进步。”

  蔡宇伽第一次重复NgAgo实验,是在韩春雨将实验所需的质粒上传到非营利性质粒共享信息库Addgene后不久,蔡宇伽在一个基因上尝试了NgAgo系统,没有成功。

  第二次,根据韩春雨8月8日上传的新版实验方法,在人类细胞上,蔡宇伽“完整”、“严格”地按照实验方法来做,“我不能保证条件是完全一样的,是按实验室条件最大程度地接近”。在蔡宇伽使用了两种不同的转染方法(Lipofectamine 2000和钙磷法)后,结果是“都没有看到NgAgo有活性,而CRISPR都是有效的。”

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