分光光度法指的是运用分光光度计的分析法，具备敏感、精确、迅速及可选择性好等特征。一般测量样品溶液浓度最低值能达10-6~10-5mol/L，适用测量食品类中的微量成分（如肉食品中的亚硫酸盐、糖果中的二氧化硫等）。
分光光度计的原理：1.物质对光线的选择性吸收：当光束直射物质上时，光与物质形成相互影响，形成反射、散射、吸收或透射。若被直射的是均匀溶液，光的散射能够忽视。溶液色调的形成：当一缕白光借助某一有色溶液时，某些波长的光被溶液吸收，另某些波长的光则通过溶液。透射光或反射光刺激性人的眼睛使人感受色调的存在。人把自己本身能感受到的光界定为可见光。在可见光区，不一样波长的光呈现出不一样的色调，因而溶液的色调由透射光的波长所决定。透射光与吸收光可组合成白光，故称这俩种光相互补色光，俩种色调相互补色。
2.光吸收的本质：当一缕光直射某物质或其溶液时，组合成该物质的分子结构、原子或离子与光子形成“对撞”，光子的能量就迁移到分子结构、原子或离子上，是这类粒子由最底能态（基态）越迁到较高能太（激发态），这一作用称之为物质对光线的吸收。被激发的粒子约在10-8s后回去基态，并且以热或荧光等方式释放出来能量。分子结构、原子或离子具备不持续的量子化能级，仅当直射光光子的能量hυ，与被直射物质粒子的基态和激发态能量之差相当时，才可以形成吸收。不一样的物质微粒因为构造不一样而具备不一样的量子化能级，其基态和激发态能量差也并不一样。因此物质对光线的吸收具备可选择性。
3.吸收曲线：吸收曲线，也称之为吸收光谱，叙述了物质对不一样波长的光的吸收力。将不一样波长的光通过某一固定不动浓度和厚度的有色溶液，精确测量每一个波长下有色溶液对光线的吸收程度（即吸光度），随后以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，绘制的曲线即是吸收曲线。不一样浓度的相同物质，在吸收峰周边的吸光度随着浓度增加而增大，但最大吸收波长不会改变。若在最大吸收波长处测量吸光度，则敏感度很高。因而，吸收曲线是分光光度法中挑选测量波长的首要条件。