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激发光谱与发射光谱
来源: | 作者:shyuexi | 发布时间: 2019-12-30 | 6180 次浏览 | 分享到:
激发光谱与发射光谱
荧光是一种光致发光现象。只有选择合适波长的激发光,才可能得到合适的荧光光谱。若固定测量波长为荧光的最大发射波长,改变激发波长并记录相应的荧光强度,根据所测得的荧光强度与激发光波长的关系即可绘制出激发光谱曲线。在激发光谱图上的荧光强度最大处所对应的激发波长即为最大激发波长λex。在最大激发波长的光照射下,处于激发态的分子数目最多,物质吸收的光能量也最多,自能产生最强的荧光现象。
若固定荧光最大激发波长,不断改变荧光的发射波长并记录相应的荧光强根据发射波长与荧光强度关系可绘制出荧光发射光谱曲线,发射光谱即为通常所说的荧光光谱。发射光谱图上的荧光强度最大处所对应的发射波长即为最大发射波长λem。
理论上,同种化合物的激发光谱与紫外—可见分光光度计上得到的吸收光谱的形状应相同,实际上,由于荧光仪的光源、单色器、检测器的光谱特性,袭观激发光谱与吸收光谱的形状往往存在较大差异;校正后的激发光谱的形状才与吸收光谱比较接近。
在实际测定中,激发光谱的波长扫描一般在190~650nm范围内,发射光谱的波长扫描在200~800nm范围内。化合物溶液的荧光光谱总是滞后于激发光谱,存在斯托克斯位移。这是由于在荧光产生的过程中,存在各种形式的无辐射跃迁程、能量损失。这也导致最大发射波长都较最大激发波长位呈发生红移,即λem>λex,同时发射光的强度也会比激发光的强度减弱很多。
化合物溶液的发射光谱与吸收光谱之间存在着“镜像对称”的关系。应用“镜像对称”规则,可以帮助判别某个吸收带是属于第一吸收带中的另一振謝驟,一更高电子态的吸收带。还可以用来判断体系中是否有杂散光或者杂綮质的存在。
许多荧光物质具有特征的最大激发波长和最大荧光波长,可根据其殳射光谱和激发光谱来鉴别这些荧光物质,同时在定量分析中可作为最灵敏的测定条件。

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